一、方法原理

样品用0.25mol/L盐酸水解，活性炭-活性白土-酸性氧化铝柱色谱净化，经羟基乙基化反应后，弗罗里硅土(Florisil)柱色谱净化，气相色谱法氮磷检测器(NPD)测定。

二、样品处理

1、提取

(1)稻米和稻秆样品中克百威的提取：称10g粉碎样品，加150mL 0.25mol/L盐酸，回流1h。冷却后过滤，用40Ml 0.25/mo1/L盐酸冲洗冷凝器和烧瓶，并用O.25mol/L盐酸调节体积至200mL。取100n止(相当于5样品)水解液置于200H也烧杯中，加10mol/L氢氧化钠和2mol/L氢氧化钠水溶液调水解液pH至4(用pH计)。放置低温下使溶液沉淀，过滤后用15n止pH4缓冲溶液洗滤纸和漏斗，滤液中加3n也浓盐酸。然后加20mL 4％硫酸钠水溶液和5n也4%十二烷基磺酸钠水溶液，用二氯甲烷提取，提取3次，每次50mL，收集提取液并经无水硫酸钠干燥，加9滴1％甘油乙酸乙酯溶液，浓缩至3～5n也。然后加3×10mL乙酸乙酯，浓缩至3～5mL，这个加乙酸乙酯和浓缩的操作重复3次。

(2)土壤样品中克百威的提取：称20g过40目筛样品，加2g Celite 545(助滤剂)和4 mL 0.25 mol／L盐酸混匀后置于索氏提取器中，加120mL二氯甲烷，提取8h。冷却(快速冷却)后，提取液中加9滴1％甘油乙酸乙酯溶液，浓缩至3～5mL。再加3×10mL乙酸乙酯，浓缩至3～5mL，这个加乙酸乙酯和浓缩的操作重复3次。

(3)田水样品中克百威的提取：量取200mL经过滤的样品，加40mL 4％硫酸钠水溶液，分别用100mL 50mL和50mL二氯甲烷提取，收集二氯甲烷提取液并经无水硫酸钠干燥，加9滴l％甘油乙酸乙酯溶液，浓缩至3～5mL。然后加10mL乙酸乙酯，浓缩至3～5mL，这个加乙酸乙酯和浓缩的操作重复3次。

2、色谱净化

在20cm长、1cm内径色谱柱中上下两端加2cm厚无水硫酸钠，中间加2g活性炭(Darco G60)一活性白土(Attaclay)(1∶5，m/m)和4g酸性氧化铝。用乙酸乙酯预淋，将乙酸乙酯提取浓缩液转移至柱中，用50mL乙酸乙酯淋洗，收集全部淋出液并浓缩至2～3mL。
羟基乙基化反应及其净化：用5mL无水乙醇将浓缩淋出液转至圆底烧瓶中，再用5mL无水乙醇洗原容器并入圆底烧瓶中，加2滴浓盐酸和几粒沸石，回流45min，用冰水冷却，然后通过冷凝器加100mL冷0.25mol/L盐酸(1～2℃)，用二氯甲烷提取3次，每次50mL，收集提取液并经无水硫酸钠干燥，浓缩至约3mL。然后加10mL正己烷，浓缩至2～3mL，此操作重复3次。

在25cm长、1.5cm内径的色谱柱中上下两端加2cm厚无水硫酸钠，中间加10g弗罗里硅土，将羟基乙基化反应的正己烷浓缩液转移至柱中，先用100mL正己烷-乙酸乙酯(9∶l，V/V)淋洗，弃去淋出液，再用60mL正己烷-乙酸乙酯(7∶3，V/V)淋洗，收集淋出液并浓缩至约3mL，用乙酸乙酯定容，待测。

相关链接：乙酸乙酯，克百威，二氯甲烷