北方伟业计量集团有限公司
为了确定PCR产物是否是预先设计的目的片段，或产物是否有突变，都需做分子杂交检测。分子杂交包括点杂交和Southern印迹杂交。点杂交无需进行电泳，直接对产物进行分析鉴定，还可将样品稀释成一系列不同浓度，对扩增产物进行定量分析。该法灵敏度较高，特别适用于特异性不高的PCR扩增产物分析。其基本过程是将扩增产物固定到尼龙膜或硝酸纤维素膜上，用放射性或非放射性标记的探针杂交，还可将不同的探针固定到膜上，用标记的扩增产物进行杂交，称为“反向点杂交法”，该法可同时检测多个突变位点或多种病原体。目前主要用寡核苷酸探针杂交(ASO)检测点突变。
采用常规的Southern印迹杂交可鉴定PCR产物的大小和特异性，检测灵敏度可达10ng。基本过程是PCR产物进行常规的琼脂糖凝胶电泳，然后印迹转移到尼龙膜上，再用标记的探针进行杂交检测。
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